第一节 乳铁蛋白基本生产技术、工艺或流程
乳铁蛋白的分离纯化方法较多,包括吸附色谱法、离子交换色谱法、亲和色谱法、固定化单克隆抗体法、超滤法、盐析法等等。
超滤法操作简便,费用相对低,易于形成工业化规模,其缺点是纯度较低,膜需要经常清洗。此法是生产食品用乳铁蛋白最具实现工业化潜力的方法之一。此外,盐析法和有机溶剂沉淀法也是分离蛋白质常用的方法,相对于目前报道所用的离子交换层析和凝胶层析方法比较简单,易于操作,而且成本相对较低,适用于保健品和食品添加剂等纯度要求不高的 行业 。
离子交换色谱法分离乳铁蛋白流程图
第二节 乳铁蛋白新技术研发、应用情况
在许多国家乳铁蛋白早已引起关注。
在我国,中国农业大学农业生物技术国家重点实验室李宁等首先从牛基因文库中克隆了as1酪蛋白基因的启动区,并对启动区的部分核酸序列作了 分析 ,这为进一步 研究 奠定了基础。
另外,江南大学食品学院和无锡日用化工应用 研究 所合作,采用膜分离技术和色谱技术结合的生产工艺,从初乳中分离出乳铁蛋白。初乳的批处理量为300kg。鉴定专家一致认为该工艺降低了生产成本,攻克了工业化分离纯化技术难点,属国内首创,达到国际先进水平。
第三节 乳铁蛋白国外技术发展现状
由于乳铁蛋白具有以上的生理功能,在许多发达国家乳铁蛋白早已引起众多专家的关注。功能性食品方面美国食品药品管理局(FDA)允许乳铁蛋白作为食品添加剂用于运动、功能性食品,在日本、韩国也允许乳铁蛋白作为食品添加剂用于食品。日本于1986年最先开发出添加乳铁蛋白的婴儿配方乳粉、脱脂乳粉等产品。目前这种营养物质在国外已广泛应用于乳制品中,如酸奶、婴儿配方奶粉,尤其婴儿配方奶粉中的使用较多。
在新西兰、澳大利亚等乳业发达国家.随着超滤和冷冻干燥等技术的应用.乳铁蛋白已经实现了工业化生产。在保持乳铁蛋白产品生物活性以及不会有苦涩味道的同时,产品纯度已经可以超过90%.这保证了乳铁蛋白在婴幼儿配方产品、保健食品和发酵乳制品等领域得到越来越广泛的应用。
第四节 乳铁蛋白技术开发热点、难点 分析
1、热点、难点 分析
早在上个世纪80年代报道,由单核细胞因子产生的乳铁蛋白释放因子能以计量依赖方式,使噬中性粒细胞中的一些特殊颗粒释放乳铁蛋白,而不影响初级噬中性粒细胞的释放。这些 研究 成果,解释了感染期间血清中乳铁蛋白升高的原因。使我们对乳铁蛋白在宿主抗感染免疫中的作用有了进一步的了解。
乳铁蛋白可被视为抗炎因子,血清中乳铁蛋白的浓度升高可作为炎症反应的一个指标。乳铁蛋白还具有促进中性白细胞对受伤部分的吸附和聚集、增加粒细胞、粘性、促进细胞间相互作用、调节免疫球蛋白分泌、参与调节机体免疫耐受能力、抑制补体系统激活已有的补体途径等功能。
目前对乳铁蛋白的 研究 已经非常广泛和深入,现在对其 研究 热点主要集中在活性乳铁蛋白的开发应用和用转基因技术高效表达人乳乳铁蛋白两个方面。
2、牛初乳中提取乳铁蛋白工艺的 研究
牛初乳是自然界免疫因子最为富集的生物资源之一,初乳资源的开发已越来越引起人们的兴趣,但目前初乳只是作为保健食品的原料,产品中活性物质的有效浓度不够高,其生物活性在加工过程中损失较大,初乳本身所具备的潜在价值得不到充分的反映。实际上牛初乳中很多免疫因子和生长因子具有很大的药用前景,如高纯度的乳铁蛋白。乳铁蛋白在初乳中的质量密度要比常乳高10~100倍,可达1.00g/L,因此若能开发出合理的分离路线,高纯度LF前景广阔。
从牛初乳中提取LF的工艺,目前主要有色谱法和超滤法。
超滤法虽适合大规模生产,但还无法提取高纯度(>95%)的LF,色谱法是目前提取高纯度LF的主要工艺,但传统的方法一般是组合采用阴离子交换色谱和分子排阻色谱,产品成本较高,工业化困难。
第五节 乳铁蛋白未来技术发展趋势
目前,应用乳铁蛋白主要是从乳清中分离的天然蛋白,每公斤价格约1000美元。为了能更广泛的应用乳铁蛋白,必须获得廉价的重组蛋白。因此应得到高效表达的重组乳铁蛋白的转基因生物,以满足市场需求,这正是乳铁蛋白 研究 发展的趋势。
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