第一节 产品技术发展现状
液相色谱仪新型号不多,以HPILC仪为主。近年来毛细管电泳的发展对离子色谱的冲击很大,事实上,离子色谱(IC)与交换色谱(EC)这两种不同的 分析 技术各有优缺点,二者不可能完全取代对方。使用离子色谱的金属离子 分析 中,高纯试剂仍有一定的用量,不过,其品种、规格、价格等变化较大。另外,国外试剂目录新编的用于HPLC的离子对试剂也不少。与HPLC相关的试剂,其主要问题是每个品种需求量不多而质量要求高,如果选用进口品种,则价格不低。
第二节 产品工艺特点或流程
色谱法的分离原理是:溶于流动相(mobilephase)中的各组分经过固定相时,由于与固定相(stationaryphase)发生作用(吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和)的大小、强弱不同,在固定相中滞留时间不同,从而先后从固定相中流出。又称为色层法、层析法。
HPLC多种缓冲液配制过程如下:
1、乙醇-醋酸铵缓冲液(PH3.7)
取5mol/L醋酸溶液15.0ml,加乙醇60ml和水20ml,用10mol/L氢氧化铵溶液调节PH值至3.7,用水稀释至1000ml即得。
2、三羟甲基氨基甲烷缓冲液(PH8.0)
取三羟甲基氨基甲烷12.14g,加水800ml,搅拌溶解,并稀释至1000ml,用6mol/L盐酸溶液调节PH值至8.0即得
3、三羟甲基氨基甲烷缓冲液(PH8.1)
取氯化钙0.294g,加0.2mol/L三羟甲基氨基甲烷溶液40ml使溶解,用1mol/L盐酸溶液调节PH值至8.1,加水稀释至100ml,即得。
4、三羟甲基氨基甲烷缓冲液(PH9.0)
取三羟甲基氨基甲烷6.06g,加盐酸赖氨酸3.65g、氯化钠5.8g乙二胺四醋酸二钠0.37g,再加水溶解使成1000ml,调节PH值至9.0,即得。
5、乌洛托品缓冲液
取乌洛托品75g,加水溶解后,加浓氨溶液4.2ml,再加水稀释至250ml,即得。
6、巴比妥缓冲液(PH7.4)
取巴比妥钠4.42g,加水使溶解并稀释至400ml,用200mol/L盐酸溶液调节PH值至7.4滤过,即得。
7、巴比妥缓冲液(PH8.6)
取巴比妥5.52g与巴比妥钠30.9g,加水使溶解成2000ml,即得。
8、巴比妥-氯化钠缓冲液(PH7.8)
取巴比妥钠5.05g,加氯化钠3.7g及水适量溶解,另取明胶0.5g加水适量,加热溶解后并入上述溶液中。然后用0.2mol/L盐酸溶液调节PH值至7.8,再加水稀释至500ml即得。
9、甲酸钠缓冲液(PH3.3)
取2mol/L甲酸溶液25ml,加酚酞指示液1滴,用2mol/L氢氧化钠溶液中和,再加入2mol/L甲酸溶液75ml,用水稀释至200ml,调节PH值至3.25~3.30,即得。
10、邻苯二甲酸盐缓冲液(PH5.6)
取邻苯二甲酸钾10g,加水900ml,搅拌使溶解,用氢氧化钠试液(必要时用稀盐酸)调节PH值至5.6加水稀释至1000ml,混匀,即得。
11、枸橼酸盐缓冲液
取枸橼酸4.2g加1mol/L的20%乙醇制氢氧化钠溶液40ml使溶解,再加20%乙醇稀释至100ml即得。
12、枸橼酸盐缓冲液(PH6.2)
取2.1%枸橼酸水溶液,用50%氢氧化钠溶液调节PH值至6.2即得。
13、枸橼酸--磷酸氢二钠缓冲液(PH4.0)
甲液:取枸橼酸21g或无水枸橼酸19.2g加水使溶解成1000ml,置冰箱内保存。
乙液:取磷酸氢二钠71.63g,加水使溶解成1000ml。取上述甲液61.45ml与乙液38.55ml混合摇匀,即得。
14、氨-氯化铵缓冲液(PH8.0)
取氯化铵1.07g,加水使溶解成100ml,再加稀氨溶液(1→30)调节PH值至8.0即得。
15、氨-氯化铵缓冲液(PH10.0)
取氯化铵5.4g,加水20ml溶解后,加浓氯溶液35ml,再加水稀释至100ml,即得。
16、硼砂-氯化钙缓冲液(PH8.0)
取硼砂0.572g与氯化钙2.94g,加水约800ml溶解后,用1mol/L盐酸溶液约2.5ml调节PH值至8.0,加水稀释至1000ml即得。
17、硼砂-碳酸钠缓冲液(PH10.8~11.2)
取无水碳酸钠5.30g,加水使溶解成1000ml;另取硼砂1.91g,加水使溶解成100ml临用前取碳酸钠溶液973mol/L与硼砂溶液27ml,混匀,即得。
18、硼酸-氯化钾缓冲液(PH9.0)
取硼酸3.09g,加0.1mol/L氯化钾溶液500ml使溶解再加0.1mol/L氢氧化钠溶液210ml即得。
19、醋酸盐缓冲液(PH3.5)
取醋酸铵25g,加水25ml溶解后,加7mol/L盐酸溶液38ml,用2mol/L盐酸溶液或5mol/L氨溶液准确调节PH值至3.5(电位法指示),用水稀释至100ml即得。
20、醋酸-锂盐缓冲液(PH3.0)
取冰醋酸50ml,加水800ml混合后,用氢氧化锂调节PH值至3.0再加水稀释至1000ml,即得。
21、醋酸-醋酸钠缓冲液(PH3.6)
取醋酸钠5.1g,加冰醋酸20ml,再加水稀释至250ml即得。
22、醋酸-醋酸钠缓冲液(PH3.7)
取无水醋酸钠20g,加水300ml溶解后,加溴酚蓝指示液1ml及冰醋酸60~80ml,至溶液从蓝色转变为纯绿色,再加水稀释至1000ml即得。
23、醋酸-醋酸钠缓冲液(PH3.8)
取2mol/L醋酸钠溶液13ml与2mol/L醋酸溶液87ml,加每1ml含铜1mg的硫酸铜溶液0.5ml,再加水稀释至1000mol/L即得。
24、醋酸-醋酸钠缓冲液(PH4.5)
取醋酸钠18g,加冰醋酸9.8ml,再加水稀释至1000ml即得。
25、醋酸-醋酸钠缓冲液(PH4.6)
取醋酸钠5.4g,加水50ml使溶解,用冰醋酸调节PH值至4.6,再加水稀释至100ml,即得。
26、醋酸-醋酸钠缓冲液(PH6.0)
取醋酸钠54.6g,加1mol/L醋酸溶液20ml溶解后,加水稀释至500ml,即得。
27、醋酸-醋酸钾缓冲液(PH4.3)
取醋酸钾14g,加冰醋酸20.5ml,再加水稀释至1000ml即得。
28、醋酸-醋酸铵缓冲液(PH4.5)
取醋酸铵7.7g,加水50ml溶解后,加冰醋酸6ml,与适量水使成100ml,,即得。
29、醋酸-醋酸铵缓冲液(PH6.0)
取醋酸铵100g,加水300ml使溶解,加冰醋酸7ml摇匀,即得。
30、磷酸-三乙胺缓冲液
取磷酸约4ml与三乙胺约7ml,加50%甲醇稀释至1000ml,用磷酸调节PH值至3.2即得。
31、磷酸盐缓冲液
取磷酸二氢钠38.0g,与磷酸氢二钠5.04g加水使成1000ml,即得。
32、磷酸盐缓冲液(PH2.0)
甲液:取磷酸16.6ml,加水至1000ml,摇匀。
乙液:取磷酸氢二钠71.63g,加水使溶液成1000ml取上述甲液72.5ml与乙液27.5ml混合,摇匀即得。
33、磷酸盐缓冲液(PH2.5)
取磷酸二氢钾100g,加水800ml,用盐酸调节PH至2.5,用水稀释至1000ml
34、磷酸盐缓冲液(PH5.0)
取0.2mol/L磷酸二氢钠溶液一定量,用氢氧化钠试液调节PH值至5.0,即得。
35、磷酸盐缓冲液(PH5.8)
取磷酸二氢钾8.34g与磷酸氢二钾0.87g,加水使溶解成1000ml,即得。
36、磷酸盐缓冲液(PH6.5)
磷酸二氢钾0.68g,加0.1mol/L氢氧化钠溶液15.2ml,用水稀释至100ml,即得。
37、磷酸盐缓冲液(PH6.6)
取磷酸二氢钠1.74g、磷酸氢二钠2.7g与氯化钠1.7g,加水使溶解成400ml,即得。
38、磷酸盐缓冲液(含胰酶)(PH6.8)
取磷酸二氢钾6.8g,加水500ml使溶解,用0.1mol/L氢氧化钠溶液调节PH值至6.8;另取胰酶10g,加水适量溶解,将两液混合后,加水稀释至1000ml,即得。
39、磷酸盐缓冲液(PH6.8)
取0.2mol/L磷酸二氢钠溶液250ml,加0.2mol/L氢氧化钠溶液118ml,用水稀释至1000ml摇匀,即得。
40、磷酸盐缓冲液(PH7.0)
取磷酸二氢钾0.68g加0.1mol/L氢氧化钠溶液29.1ml,用水稀释至100ml,即得。
41、磷酸盐缓冲液(PH7.2)
取0.2mol/L磷酸二氢钾溶液50ml与0.2mol/L氢氧化钠溶液35ml,加新沸过的冷水稀释至200ml摇匀,即得。
42、磷酸盐缓冲液(PH7.3)
取磷酸氢二钠1.9734g与磷酸二氢钾0.2245g,加水使溶解成1000ml,调节PH值至7.3,即得。
43、磷酸盐缓冲液(PH7.4)
取磷酸二氢钾1.36g加0.1mol/L氢氧化钠溶液79ml,用水稀释至200ml,即得。
44、磷酸盐缓冲液(PH7.6)
取磷酸二氢钾27.22g,加水使溶解成1000ml,取50ml,加0.2mol/L氢氧化钠溶液42.4ml,加水稀释至200ml即得。
45、磷酸盐缓冲液(PH7.8)
甲液:取磷酸氢二钠35.9g,加水溶解,并稀释至500ml。
乙液:取磷酸氢二钠2.76g,加水溶解,并稀释至100ml。取上述甲液91.5ml与乙液8.5ml混合,摇匀,即得。
46、磷酸盐缓冲液(PH7.8~8.0)
取磷酸二氢钾5.59g与磷酸二氢钾0.41g,加水使溶解成1000ml,即得。
第三节 国内外技术未来发展趋势 分析
目前UPLC还不能完全取代HPLC,但UPLC的应用会越来越普及,这是个趋势。在原理上UPLC与HPLC之间没有的本质区别,UPLC特点首先是颗粒度小,柱效显著增加,;其次是小颗粒在柱效不损失的情况下可以高线性流速运行,极大地提高了样品通量。现在也用HPLC,它的柱子相对较粗,适合做微量制备。选择UPLC还是HPLC,要看用户自身是否需要更高柱效进行复杂难分离样品的 分析 ,是否有高通量的需求。虽然UPLC比HPLC贵,但溶剂消耗大大降低,而且效率高,所以性价比高。因此随着UPLC技术的发展及它所带来的显而易见的优势,今后UPLC将会越来越普及。
色谱今后的发展重点还是要开发新的分离材料或改进已有材料,不断推出新柱子,提高分离能力。此外还要继续深入
研究
二维色谱,虽然目前二维色谱定量不足,也没有进入大批量生产阶段。
免责申明:本文仅为中经纵横
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